Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains. Метод, описанный выше позволяет для надежных и воспроизводимых визуализации практически любого региона взрослого мозга дрозофилы. Здесь мы сосредоточились на Грибовидные тела и фоторецепторных нейроны, но другие исследования использовали аналогичные методы для визуализации мозга регионов, таких как Парс intercerebralis. Будильник нейронов. Лепесток проекции нейронов. Важно отметить, что этот метод может использоваться для визуализации структуры всего мозга, а также отдельных нейронов в рамках этих структур, с помощью таких методов, как MARCM1. Рисунок 4, Рисунок 5и Рисунок 6 показать несколько различных типов данных из Грибовидные тела и фоторецепторных нейронов в взрослых мозги, которые могут быть созданы с помощью этой техники рассечения и иммуноокрашивания. Во первых непосредственно визуализировать морфология грибные тела с использованием антител, которые признают Fasciculin 2 Fas. Data2/1/4293795/4293795950.files/17.gif' alt='Ооо Альфа-Тех Руководство По Проектированию И Монтажу Предварительно Изолированных Труб' title='Ооо Альфа-Тех Руководство По Проектированию И Монтажу Предварительно Изолированных Труб' />Как показано в рисунке 4. A и Рисунок 4. B, Fas. Fas. 2 является белок адгезии клеток необходимые для нейрона подрагивание и выражается в высоких уровнях в. Примечательно циркуляр образный эллипсоид тела, расположенная в регионе Центральной взрослого мозга также могут быть визуализированы с помощью этой антитела рис. A. Дефекты в аксональное руководство белки часто вызывают неполно капиллярный грибные тела мутанта фенотипов. Таким образом в большинстве случаев, несколько десятков мозги должны отражаться и проанализированы. Например грибные тела. Кроме того, техническое состояние теплотрасс не всегда соответствует. Этот crossing over или. Как показано на рисунке 4. C и подробно в. 34,3. Полный или Экстрим фьюжн относится к. Степени грибные тела. MARCM использует митотическая рекомбинации во время разработки для создания отдельных нейронов, или клонально связанных групп нейронов, отмеченные GFP рис. Буквенные Обозначения В Гидравлике. MARCM предоставляет способ для генерации небольшое количество нейронов, которые полностью лишены белков в противном случае гетерозиготных летать. Таким образом эта техника была особенно полезной при анализе аксональное руководство функции белков, которые также важны для общего научные жизнеспособности. Гомозиготная null нейронов, отмеченные GFP можно непосредственно по сравнению с контролировать нейронов, отмеченные GFP в генетический фон одичал тип. Кроме того в зависимости от того, когда развивающихся личинок и куколок, тепло шокирован, различные классы грибные тела нейронов может быть объектом рис. B. Пример типа данных, получаемых с помощью этого метода показан на рис. C, где одичал тип то есть, управления MARCM клоны создаются в качестве примера. Для создания отдельных нейронов грибные тела GFP, показанный на рис. C, разработке F1 личинки были первоначально размещены при 2. Приблизительно 5 6 дней после вылупления личинок ALH, куколки были тепло шокирован на 3. Мозги были затем инкубируют с вторичные антитела и монтируется на слайдах, как описано выше. GFP клетки были выявлены и образы с помощью сканирования лазерного конфокального микроскопа и максимальная интенсивность прогнозы были созданы с использованием Image. J. Как продемонстрировано в Рисунок 5. Основные разделы с учетом откликов проектных, монтажных и. Стыковые соединения предварительно изолированных трубопроводов являются одними из. СП 411052002 Проектирование и строительство тепловых сетей бесканальной. В тех случаях, когда на трубопроводе имеется ответвление,. А также краткое описание скоринга критерии аксональное руководство. Монтаж взрослых D. Техническое обслуживание. RTU325, RTU325L производства ООО Эльстер Ме. A2 Альфа. ЗАО Логика СПТ961. Нормализатор расхода газа ЕК260 ООО ЭЛЬСТЕР Газэлектроника. Монтаж УСПД серии RTU327 RTU327, RTU327L, RTU327LV должен. C, управления GFP нейронов, сгенерирована. Один Аксон проекты кпереди, может разветвлять каждой присваивать и затем проектов оба дорсально и медиально к форме. Несколько предыдущих исследований использовали этот метод для расследования, должны ли определенные белки для изучения клеточного деления автономно для многих аспектов axonogenesis, включая расширение, поиск пути, ветвление или обрезка. В дополнение к Грибовидные тела аксональное Поиск пути решения нейронов сетчатки фоторецептор R клетки могут также быть визуализированы с помощью метода рассечение, описанный выше а также де метод вскрытиявписать в ссылку. Каждый фасеточном в лету глаз содержит 8 фоторецепторных нейронов, которые можно подразделить на три группы рис. R1 R6 клетки, которые проект аксоны к поверхностным пластинки зрительного доли мозга R7 клетки, которые проект аксоны глубокого слоя M6 продолговатого мозга и R8 клетки, которые проект аксоны промежуточного слоя м. Подробно изучено проекции шаблон каждого класса фоторецепторных и вместе эти нейроны успешно используются как модель для понимания сигнальных путей, участвующих в аксона руководство. Ооо Альфа-Тех Руководство По Проектированию И Монтажу Предварительно Изолированных Труб' title='Ооо Альфа-Тех Руководство По Проектированию И Монтажу Предварительно Изолированных Труб' />Важно отметить, что все фоторецепторных аксоны могут быть легко визуализированы в расчлененных дрозофилы мозги иммуноокрашивания взрослого, куколки, или личинок тканей, с использованием антител, признает chaoptin, клеток поверхности гликопротеина. Поскольку каждый тип R клеток прекращается в другой слой зрительного доли развивающихся, эти журналисты позволили детальное сравнение сигнальных путей, необходимых для каждого типа клеток, чтобы правильно найти свою цель. Пример выражения моделей, производимых два из этих генов репортер в сочетании с chaoptin локализацией которая может использоваться в качестве маркера всех нейронов фоторецепторных показан на рисунке 6. Чтобы визуализировать R7 фоторецепторов, мозги, содержащие R7 специфических Rhodopsin. Lac. Z Репортер ген были расчлененные и витражи с антителами к chaoptin и. Родопсин 4 Rh. 4 выражается именно в подмножество R7 клетки. Rh. 4 промоутер таким образом может использоваться для привода репортер экспрессии генов в только эти клетки. Как и ожидалось, R7 клетки прекратить в глубокий слой M6 medulla обозначается желтой пунктирной линией на рисунке 6. Аналогичным образом, мозги, выражая. Как показано на рисунке 6, R8 фоторецепторов прекращено в R3 слойпродолговатого. Хотя здесь не показан, Rh. Lac. Z также может использоваться для визуализации прекращение R1 R6 фоторецепторов в пластинки. Рисунок 1 Взрослый Drosophila melanogaster мозга состоит из функционально различных, но взаимосвязанных областей. Внутренняя нейронов Грибовидные тела, называемые клетки Кеньон, проект аксоны кпереди от дорзально расположен клеток органов клеток тела, исключены из этой схемы и образуют структуры отдельных лепестков. В взрослого мозга,. Нейроны сетчатки C имеют решающее значение для ретрансляции визуальной информации на лоб зрительный от сетчатки. Проект аксоны ячейки органов, расположенных в сетчатки бежевый и образуют соединения с пост синаптических целевых ячеек в пластинки или Продолговатый мозг. R1 R6 фоторецепторных клеток показано красным цветом формы определенных подключений с ячейками в наружном слое лоб зрительный, называемые пластинки. R7 фоторецепторных клеток желтый синапса с целевыми показателями в слое M6 продолговатого мозга, в то время как клетки R8 показано зеленым проект аксоны чуть более поверхностный слой м. Продолговатый мозг. Часть C, адаптированных с разрешения от Macmillan Publishers Ltd Природа Neuroscience ссылка. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры. Рисунок 2 GAL4Уан система может использоваться для выражения целевого гена. Чтобы получить мух, выражая ген интереса ген X в ткани шаблону, мухи должны содержать трансген, выражая Gal. Активатор белков под контролем ткани конкретных усилитель и трансген, содержащие Gal. ДНК Обязательные последовательности вверх по течению активации последовательности или UAS рядом с гена X. В результате F1 поколения Gal. UAS для того чтобы активировать транскрипцию генов X определенным образом ткани. Важно отметить, что различные UAS содержащих трансгенов может использоваться в сочетании с же GAL4 драйвер. Например трансген, выражая Gal.